本指導原則旨在指導注冊申請人(rén)對(duì)地中海貧血相關基因檢測試劑注冊申報資料的(de)準備及撰寫，同時(shí)也(yě)爲技術審評部門對(duì)注冊申報資料的(de)技術審評提供參考。

本指導原則是對(duì)地中海貧血相關基因檢測試劑的(de)一般要求，申請人(rén)應依據産品的(de)具體特性确定其中内容是否适用(yòng)，若不适用(yòng)，需具體闡述理(lǐ)由及相應的(de)科學依據，并依據産品的(de)具體特性對(duì)注冊申報資料的(de)内容進行充實和(hé)細化(huà)。

本指導原則是對(duì)申請人(rén)和(hé)審查人(rén)員(yuán)的(de)指導性文件，但不包括注冊審批所涉及的(de)行政事項，也(yě)不作爲法規強制執行，如果有能夠滿足相關法規要求的(de)其他(tā)方法，也(yě)可(kě)以采用(yòng)，但需要提供詳細的(de)研究和(hé)驗證資料，相關人(rén)員(yuán)應在遵循法規的(de)前提下(xià)使用(yòng)本指導原則。

本指導原則是在現行法規和(hé)标準體系以及當前認知水(shuǐ)平下(xià)制定的(de)，随著(zhe)法規和(hé)标準的(de)不斷完善以及科學技術的(de)不斷發展，本指導原則相關内容也(yě)将适時(shí)進行調整。

适用(yòng)範圍

地中海貧血（簡稱地貧）是一種常染色體隐性遺傳病，是由于珠蛋白基因發生突變（包括點突變和(hé)缺失等），緻使珠蛋白肽鏈合成減少或完全不能合成而導緻的(de)一組單基因遺傳性溶血性疾病，輕者可(kě)無臨床表現，重者以進行性溶血性貧血爲主要特征。根據珠蛋白肽鏈合成受到抑制的(de)類型，地貧分(fēn)爲α-，β-和(hé)γ-地貧等，臨床上最常見的(de)是α-和(hé)β-地貧。地貧主要分(fēn)布在地中海沿岸、東南(nán)亞和(hé)少數非洲地區(qū)，具有明(míng)顯的(de)種族特性和(hé)地域分(fēn)布差異。地貧是我國南(nán)方地區(qū)最常見、危害最大(dà)的(de)遺傳病之一，尤以廣西、雲南(nán)、廣東、海南(nán)、四川和(hé)貴州等省份爲甚，雲南(nán)、海南(nán)和(hé)廣東的(de)地貧基因人(rén)群攜帶率可(kě)達10%以上，廣西更是達到了(le)20%以上。

α-地貧主要是由于α-珠蛋白基因發生突變而引起。α-珠蛋白基因簇位于16p13.3，包括胎兒(ér)期和(hé)成人(rén)期表達的(de)2個(gè)基因（α2和(hé)α1），基因的(de)排列順序爲5’-α2-α1-3’。根據單倍型的(de)情況，可(kě)将α地貧分(fēn)爲3類：（1）缺失型α+地貧（-α/），缺失1個(gè)α基因；（2）缺失型α0地貧（--/），2個(gè)α基因同時(shí)缺失；（3）非缺失型α+地貧（αTα/或ααT/ ），1個(gè)α1或α2基因發生點突變或少數幾個(gè)堿基的(de)缺失。中國現已發現至少19種α-珠蛋白基因大(dà)片段缺失和(hé)38種α-珠蛋白基因點突變。其中，6 種α-珠蛋白基因的(de)突變：--SEA/、-α3.7/、-α4.2/、αWSα/（HBA2：c.369C>G）、αQSα/（HBA2：c.377 T>C）；αCSα/（HBA2：c.427T>C）占患病人(rén)群總數的(de)98%。

α-地貧基因型和(hé)臨床分(fēn)型的(de)關系已經基本闡明(míng)。α-地貧的(de)表型嚴重程度随著(zhe)功能性α-珠蛋白基因的(de)減少而加重：（1）1個(gè)α-基因缺失或點突變（-α/αα或ααT/αα或αTα/αα），稱爲靜止型α-地貧，通(tōng)常不貧血，血液學表現爲小細胞低色素；（2）2個(gè)α-基因缺失或複合-α基因點突變，或點突變，其基因型爲--/αα或-α/-α或-α/ααT或αTα/-α或αTα/αTα，稱爲輕型α-地貧，臨床表現爲不貧血或輕度貧血，血液學檢查有小細胞低色素特征；（3）3個(gè)α-基因缺失或複合α基因點突變，基因型爲--/-α或--/αTα，稱爲中間型α-地貧，又稱Hb H病，患者有輕至重度貧血。某些基因型爲αTα/αTα的(de)病例（如αCSα/αCSα、αQSα/αQSα和(hé)αCSα/αQSα）也(yě)表現爲Hb H病。通(tōng)常，--/αTα的(de)非缺失型 Hb H病較單純缺失型Hb H病（--/-α）的(de)臨床表現更爲嚴重，特别是基因型爲--/αCSα或--/αQSα的(de)Hb H病患者，貧血程度較爲嚴重；（4）4個(gè)α-基因缺失，其基因型爲--/--，稱爲重型α-地貧，又稱Hb Bart’s胎兒(ér)水(shuǐ)腫綜合征，此類個(gè)體一般無法存活到出生或分(fēn)娩後半小時(shí)内死亡。

β-地貧是由于β-珠蛋白基因發生突變而引起，以點突變爲主，少數爲缺失型。β-珠蛋白基因簇位于11p15.3，包括2個(gè)成人(rén)期表達基因（β和(hé)δ），基因的(de)排列順序爲5’-δ-β-3’。根據β-珠蛋白鏈合成量的(de)程度，可(kě)将β-地貧分(fēn)爲3類：（1）β0地貧，β-珠蛋白鏈完全不能合成，其所在的(de)等位基因稱爲β0地貧等位基因；（2）β+地貧，β-珠蛋白鏈合成減少，其所在的(de)等位基因稱爲β+地貧等位基因；（3）β++地貧，又稱沉默型β-地貧，β-珠蛋白鏈合成輕微減少。中國已至少報道84種β-珠蛋白基因點突變和(hé)11種β-珠蛋白基因缺失。其中，6種點突變：HBB：c.126_129delCTTT，HBB：c.52A>T，HBB：c.-78A>G，HBB： c.79G>A，HBB： c.316-197C>T和(hé)HBB： c.216_217insA占了(le)全部突變類型的(de)90%以上。

β-地貧的(de)臨床表型可(kě)分(fēn)爲4種：（1）靜止型β-地貧，基因型爲β++/βN，血液學表型正常或臨界，一般隻能通(tōng)過分(fēn)子診斷識别；（2）輕型β-地貧，基因型爲β0/βN或β+/βN，臨床表現爲小細胞低色素和(hé)HbA2值升高(gāo)；（3）中間型β-地貧，基因型爲β+/β+或β+/β0，表型變異範圍大(dà)，可(kě)從輕度貧血到中度貧血，多(duō)于幼兒(ér)期出現中度貧血；（4）重型β-地貧，基因型爲β+/β0或β0/β0，通(tōng)常伴有嚴重貧血，需要定期輸血才能存活。患兒(ér)出生時(shí)無症狀，常于嬰兒(ér)期（3-12月(yuè)齡）發病。如不治療，患兒(ér)多(duō)于5歲前死亡。此外，中間型的(de)分(fēn)子基礎較爲複雜(zá)，顯性β-地貧突變的(de)雜(zá)合子（βD/βN），合并α-地貧突變的(de)β-地貧突變純合子（β0/β0），或合并α-珠蛋白三聯體的(de)β-地貧突變雜(zá)合子（β0/βN或β+/βN），也(yě)會顯示中間型的(de)表型。

2018年發布的(de)《重型β-地中海貧血的(de)診斷和(hé)治療指南(nán)》明(míng)确規定：對(duì)于重型β-地中海貧血的(de)診斷，有條件者均應進行基因診斷，基因型爲純合子或雙重雜(zá)合子爲确診本病的(de)指标。2018年發布的(de)《兒(ér)童非輸血依賴型地中海貧血的(de)診治和(hé)管理(lǐ)專家共識》也(yě)明(míng)确規定：地貧基因檢測爲非輸血依賴型地貧的(de)診斷依據之一。

另外，國家衛生健康委員(yuán)會發布的(de)相關文件要求：爲減少重型地貧患兒(ér)出生，在我國地貧高(gāo)發省份實施地貧防控試點項目。主要流程包括：（1）對(duì)新婚夫婦和(hé)計劃懷孕夫婦在懷孕前或孕期進行血常規初篩；（2）對(duì)夫婦一方或雙方血常規檢查結果陽性的(de)夫婦進行血紅蛋白分(fēn)析複篩；（3）對(duì)血紅蛋白分(fēn)析複篩結果均爲陽性的(de)夫婦，取其抗凝靜脈全血進行相應的(de)α+β地貧基因檢測；（4）綜合夫婦雙方病史詢問、地貧篩查和(hé)基因檢測結果，判定爲高(gāo)風險夫婦。對(duì)高(gāo)風險夫婦進行追蹤，及時(shí)了(le)解受檢婦女(nǚ)懷孕情況，指導女(nǚ)方在懷孕後适宜時(shí)期接受産前診斷。産前診斷的(de)對(duì)象爲胎兒(ér)，樣本類型爲胎兒(ér)的(de)絨毛、羊水(shuǐ)和(hé)臍帶血，檢測項目爲相應的(de)地貧基因檢測。

綜上，結合該類産品臨床使用(yòng)的(de)實際情況，本指導原則的(de)預期用(yòng)途可(kě)爲：用(yòng)于體外定性檢測人(rén)外周靜脈全血或胎兒(ér)羊水(shuǐ)等樣本中基因組DNA的(de)α-和(hé)/或β-地貧相關基因，用(yòng)于α-和(hé)/或β-地貧的(de)輔助診斷（遺傳診斷），地貧高(gāo)風險夫婦的(de)評估，或胎兒(ér)的(de)産前遺傳診斷等。

結合該類産品在中國注冊的(de)實際情況以及當前的(de)認知，本指導原則僅對(duì)“α-和(hé)/或β-地貧的(de)輔助診斷（遺傳診斷）”預期用(yòng)途的(de)相關内容進行了(le)詳細闡述。針對(duì)其他(tā)預期用(yòng)途，本指導原則僅對(duì)部分(fēn)内容進行了(le)闡述，申請人(rén)應根據産品特性，對(duì)本指導原則未涉及的(de)内容進行補充并做(zuò)出相應評價。

本指導原則的(de)技術要求是基于PCR探針法方法建立的(de)，對(duì)于其他(tā)分(fēn)子生物(wù)學檢測技術（如：PCR-反向點雜(zá)交法和(hé)gap-PCR法等），可(kě)能部分(fēn)要求不完全适用(yòng)或本文所述技術指标不夠全面，申請人(rén)可(kě)以根據産品特性對(duì)不适用(yòng)部分(fēn)進行或補充其他(tā)的(de)評價和(hé)驗證，但需闡述不适用(yòng)的(de)理(lǐ)由，并驗證替代方法的(de)科學合理(lǐ)性。

本指導原則适用(yòng)于進行首次注冊申報和(hé)相關許可(kě)事項變更的(de)産品。

詳細内容，見https://www.cmde.org.cn/CL0112/20612.html